塞来昔布增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 对甲状腺髓样癌TT细胞凋亡作用的研究

更新时间:2015-09-02

【摘要】目的探讨塞来昔布( celecoxib)增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis fac-tor-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL)诱导甲状腺髓样癌TT细胞凋亡的效应及相关机制。方法MTT法检测TRAIL、celecoxib及2者联合应用对TT细胞的增殖作用；PI单染流式细胞仪检测联合用药对TT细胞周期的影响；Hochest33258染色和DNA ladder检测联合用药对TT细胞凋亡的作用；Western blot检测cyclin A、Cdk2、caspase-8、c -FLIP、RIP蛋白表达改变。结果  ①MTT实验显示：TRAIL1000 ng/ml与celecoxib 50 IiM联合用药的增殖抑制率为(47.53%±1.34%)，明显高于单用TRAIL(7. 75% +3. 84%)殁celecoxib( 24. 49%±1.57%)之和组（￡检验，F=5.234，P<O．叭），差异有统计学意义；②PI检测显示：celecoxib组和联合用药组GO/G1期细胞明显高于Control组和TRAIL组（F=242. 694，P<O．叭）；③West-ern blot检测：celecoxib组及联合用药组Cyclin A和Cdk2蛋白表达明显下调，且2者之间未见明显差异；④Hochest33258染色观察细胞核的凋亡形态学改变发现：联合用药组核固缩及核碎裂现象明显增多，其细胞凋亡率为(24.23%±2.91%)，明显高于单用TRAIL(5.86% +1.41%)及celecoxib 11( 20%±1.24%)之和（￡检验，F=1. 824，P<O．01），差异具有统计学意义；⑤Western blot检测发现：联合用药组caspase -8活化裂解程度明显增加，c - FLIP及RIP蛋白表达亦明显下调。结论celecoxib能增强TRAIL对甲状腺髓样癌TT细胞增殖的抑制作用，其机制是通过celecoxib将TT细胞阻滞于CO/G1期，并下调c-FLIP及RIP的表达，促进TRAIL财caspase-8的活化，诱导细胞凋亡。

【关键词】 celecoxib 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 周期阻滞 凋亡 TT细胞

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